1、 問:測定細(xì)胞生長曲線的意義是什么?
答:細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方法,也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo),是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因?yàn)榧?xì)胞太小,無法測單個(gè)細(xì)胞的生長狀態(tài),所以測細(xì)胞群體的生長曲線。
2、 問:如何選擇細(xì)胞接種數(shù)?
答:可根據(jù)細(xì)胞傳代培養(yǎng)過程中接種數(shù)及細(xì)胞生長周期進(jìn)行計(jì)算,細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。
3、細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)為什么要用臺(tái)盼藍(lán)染色?
答:加入臺(tái)盼藍(lán)后,活細(xì)胞不著色,臺(tái)盼藍(lán)著色的細(xì)胞呈深藍(lán)色,是不健康或已死亡的細(xì)胞,不能計(jì)數(shù)。
4、細(xì)胞生長曲線測定時(shí)為什么要做重復(fù)孔?
答:測定細(xì)胞生長曲線細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)選擇 3 個(gè)復(fù)孔,每孔分別計(jì)三次,取其平均值,目的是減小操作誤差。
5、細(xì)胞生長曲線測定周期是幾天?
答:一般是一個(gè)星期。
6、為什么繪制的細(xì)胞生長曲線沒有達(dá)到平臺(tái)期?
答:可能有以下原因:一是細(xì)胞接種密度過低;二是細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間過短;三是細(xì)胞生長狀態(tài)不好,使其不能正常增殖。
7、為什么細(xì)胞計(jì)數(shù)第一天,細(xì)胞數(shù)沒有增加反而減少?
答:一般細(xì)胞傳代后,會(huì)有一個(gè)生長緩慢的潛伏期,細(xì)胞不增殖,而細(xì)胞會(huì)有正常的死亡,故細(xì)胞數(shù)不增加反而減少。
8、細(xì)胞生長曲線還有其他方法繪制嗎?
答:當(dāng)然有。我們提到最多的是直接計(jì)數(shù)的方法,除此以外還有相對計(jì)數(shù)的方法,該類方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個(gè)變量的函數(shù)關(guān)系,然后我們只需要測定每天這個(gè)變量的值便可以計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。
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轉(zhuǎn)自:丁香園
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